Occurrence of Escherichia coli in salmon sashimis commercialized in restaurants from Londrina - PR / Ocorrência de Escherichia coli em sashimis de salmão comercializados em restaurantes de Londrina - PR

The population interest for fish consumption has increased, mainly due to several beneficial nutritional properties presented by this food. In this context, oriental culinary also brings different eating habits as consume raw food, such as sashimi. A relevant food contaminant of fecal origin is Escherichia coli, able to become potentially harmful, when it acquires virulence factors, as Shiga toxin-producing E. coli (STEC). This study aimed to evaluate 30 samples of salmon sashimi regarding the presence of E. coli, as well as perform the genotypic characterization of virulence factors associated with STEC. Three samples were collected from 10 different restaurants, specialized in Japanese culinary in the city of Londrina - PR. The E. coli identification was performed using the Colilert® chromogenic substrate technique and biochemical tests, and for the investigation of virulence genes, stx1 and stx2, the polymerase chain reaction (PCR) was used. Among the 30 samples analyzed, 15 (50%) presented contamination by E. coli. However, in no sample were detected virulence factors associated with STEC. Although human diseases associated with STEC are poorly described in Brazil, it is possible to verify that fish, mainly those consumed raw, are potential transmitters of E. coli to humans. This can compromise the food safety of these products and, thus, characterize them as unsuitable for consumption. Therefore, it is necessary the adoption of preventive measures of contamination by E. coli in products intended to human consumption, beyond more research that can verify the potential of STEC as a fish contaminant. (AU)

O interesse da população pelo consumo de peixe tem aumentado, principalmente devido às diversas propriedades nutricionais benéficas apresentadas por este alimento. Neste contexto, a culinária oriental também traz diferentes hábitos alimentares, como consumir alimentos crus, tais como o sashimi. Um relevante contaminante alimentar de origem fecal é Escherichia coli, capaz de tornarse potencialmente danosa ao adquirir fatores de virulência, como E. coli produtora de toxina Shiga (STEC). Este estudo objetivou avaliar 30 amostras de sashimi de salmão quanto à presença de E. coli, bem como realizar a caracterização genotípica de fatores de virulência associados com STEC. Três amostras foram coletadas de 10 diferentes restaurantes especializados em culinária japonesa da cidade de Londrina - PR. A identificação de E. coli foi realizada utilizando a técnica de substrato cromogênico Colilert® e testes bioquímicos, e para a investigação dos genes de virulência, stx1 e stx2, a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada. Dentre as 30 amostras analisadas, 15 (50%) apresentaram contaminação por E. coli. Contudo, em nenhuma das amostras foram detectados fatores de virulência associados com STEC. Embora as doenças humanas associadas com STEC sejam pouco descritas no Brasil, é possível verificar que os peixes, principalmente aqueles consumidos crus, são potenciais transmissores de E. coli aos humanos. Isto pode comprometer a segurança alimentar destes produtos e, assim, caracterizá-los como impróprios para o consumo. Portanto, é necessária a adoção de medidas preventivas de contaminação por E. coli nos produtos destinados ao consumo humano, além de mais pesquisas que possam verificar o potencial de STEC como um contaminante de peixes. (AU)

Identification of Salmonella spp., Listeria monocytogenes, and indicator microorganisms in commercialized raw meats and fresh sausages from Uruguaiana, Rio Grande do Sul, Brazil / Identificação de Salmonella spp., Listeria monocytogenes e micro-organismos indicadores em carnes cruas e embutidos frescais comercializados na cidade de Uruguaiana, Rio Grande do Sul, Brasil

ABSTRACT: This study evaluated the sanitary hygienic quality and the presence of pathogenic microorganisms in raw meats and fresh sausages marketed in the city of Uruguaiana, Rio Grande do Sul (RS), Brazil. We analyzed 238 samples of fresh sausages, beef, pork, and chicken from 18 commercial establishments (butchers, supermarkets, and groceries). Samples were subjected to enumerate hygiene indicator microorganisms (mesophilic aerobes and enterobacteria) and detection of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. The mean counts of mesophilic aerobes and enterobacteria were 5.09 and 3.54 log CFU/g, respectively. Beef samples presented the highest frequency of Salmonella spp. (7.93%) and fresh sausages present the highest frequency of L. monocytogenes (19.04%). Among the analyzed samples, 43.70% did not comply with the microbiological parameters established by the Brazilian Ministry of Health. The presence of Salmonella spp. and L. monocytogenes in different samples and commercial establishments demonstrate the failures of good manufacturing practices in industrial environmental and retails points and the need to train food handlers to reduce the exposure of consumers to potential risks.

RESUMO: Este estudo teve como objetivo avaliar a qualidade higiênica sanitária e a presença de microrganismos patogênicos em carnes in natura e linguiças frescais comercializadas na cidade de Uruguaiana, Rio Grande do Sul (RS), Brasil. Foram analisadas 238 amostras de linguiças, carne bovina, suína e de frango de 18 estabelecimentos comerciais (açougues, supermercados e mercearias). As amostras foram submetidas à enumeração de microrganismos indicadores de higiene (aeróbios mesófilos e enterobactérias) e detecção de Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. As contagens médias de aeróbios mesófilos e enterobactérias foram 5,09 e 3,54 log UFC/g, respectivamente. Salmonella spp. esteve presente mais frequentemente em amostras de carne bovina (4,91 %), enquanto L. monocytogenes foi mais frequente em linguiças frescais (19,04 %). Das amostras analisadas, 43,70 % não atenderam aos parâmetros microbiológicos estabelecidos pelo Ministério da Saúde. A presença de Salmonella spp. e L. monocytogenes em diferentes amostras e estabelecimentos comerciais demonstra falhas de boas práticas de fabricação na indústria e pontos de venda, além da necessidade de treinar manipuladores de alimentos para reduzir a exposição dos consumidores à riscos.

Sequence-based identification of microbial contaminants in non-parenteral products

ABSTRACT Phenotypic profiles for microbial identification are unusual for rare, slow-growing and fastidious microorganisms. In the last decade, as a result of the widespread use of PCR and DNA sequencing, 16S rRNA sequencing has played a pivotal role in the accurate identification of microorganisms and the discovery of novel isolates in microbiology laboratories. The 16S rRNA region is universally distributed among microorganisms and is species-specific. Accordingly, the aim of our study was the genotypic identification of microorganisms isolated from non-parenteral pharmaceutical formulations. DNA was separated from five isolates obtained from the formulations. The target regions of the rRNA genes were amplified by PCR and sequenced using suitable primers. The sequence data were analyzed and aligned in the order of increasing genetic distance to relevant sequences against a library database to achieve an identity match. The DNA sequences of the phylogenetic tree results confirmed the identity of the isolates as Bacillus tequilensis, B. subtilis, Staphylococcus haemolyticus and B. amyloliqueficians. It can be concluded that 16S rRNA sequence-based identification reduces the time by circumventing biochemical tests and also increases specificity and accuracy.

RESUMO Os perfis fenotípicos para identificação microbiana são incomuns para micro-organismos raros, de crescimento lento e exigentes. Na última década, em resultado do uso generalizado de PCR e sequenciação de DNA, a sequenciação do rRNA 16S tem desempenhado papel crucial na identificação precisa do micro-organismo e a descoberta de novos isolados em laboratórios de microbiologia. A região de rRNA 16S é universalmente distribuída entre micro-organismos e é espécie-específica. A genotipagem foi realizada sobre os organismos isolados a partir de formulações farmacêuticas não parenterais. O DNA foi separado dos cinco isolados obtidos a partir das formulações. As regiões alvo dos genes de rRNA foram amplificados por PCR e sequenciados utilizando os iniciadores adequados. Os dados dos sequência foram analisados e alinhados na ordem crescente de distância genética de sequências relevantes contra biblioteca de dados para obter a identidade. A sequência de DNA de árvores filogenéticas confirma a identidade dos isolados como Bacillus-tequilensis, B. subtilis, Staphylococcus haemolyticus e B. amyloliqueficians. Pode-se concluir identificação baseada na sequência do rRNA 16S reduz o tempo por evitar testes bioquímicos e também aumenta a especificidade e a precisão.

Proposta de elaboração e implementação do plano APPCC para estábulo leiteiro de caprinos / Proposal preparation and implementation of HACCP system for dairy goat barn

A qualidade insatisfatória do leite produzido no Brasil é um problema crônico, de difícil solução, onde fatores de ordem social, econômica, cultural e até mesmo climática estão envolvidos. O planejamento, a implantação e a validação de um programa de APPCC (Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle), para um estábulo leiteiro, fazem parte de uma sistemática de procedimentos, que tem por objetivo identificar, avaliar e controlar os perigos para a saúde do consumidor e caracterizar os pontos e controles considerados críticos, para assegurar a inocuidade dos alimentos. Há pontos no programa, que podem ser generalizados para todas as propriedades leiteiras, porém, há particularidades que deverão ser levadas em consideração, para atender a todos os requisitos. Este trabalho descreve um programa básico de APPCC , voltado exclusivamente para a propriedade leiteira de caprinos, visando a manutenção da qualidade do leite de cabra, comercializado, na maioria das vezes, na forma de leite fluido e derivados informais ou artesanais.

Avaliação da redução da carga microbiana de droga vegetal através do processamento tecnológico: decocção e secagem por aspersão / Evaluation of microbial contamination reduction on plants through technological process of decoction and spray dry

As plantas medicinais podem representar importantes alternativas terapêuticas. No entanto, para elaboração de um fitoterápico a contaminação microbiana constitui um problema a ser vencido. O processamento tecnológico da matéria-prima envolve etapas, geralmente, desfavoráveis à sobrevivência de microrganismos, sendo sua eliminação dependente da carga microbiana inicial e das condições de trabalho utilizadas. Assim, este estudo teve como objetivo verificar a contaminação microbiana presente nas partes aéreas de Phyllanthus niruri e produtos derivados, solução extrativa (SE) e produto seco por aspersão (PSA), a fim de avaliar a redução da contaminação após a decocção e a secagem por aspersão. A determinação dos microrganismos viáveis nos produtos foi realizada através do método de contagem em placas, e a quantificação de coliformes totais pela técnica do número mais provável. Os resultados demonstraram que carga microbiana dos produtos analisados encontrava-se abaixo do limite máximo permitido. Em relação à droga vegetal, a solução extrativa apresentou carga microbiana consideravelmente menor, sugerindo que a decocção tenha sido responsável pela redução de 98,3 por cento da contaminação inicial. Por outro lado, a carga microbiana do PSA foi semelhante a da SE, indicando que os microrganismos não são afetados pela operação de secagem por aspersão.

Medicinal plants can be important therapeutic alternative, however microbiological contamination of plants represent a problem to be solved before the production. The technologic process of raw material has many stages, generally, adverse to microbial growth, but its complete elimination depends on the initial and work condition utilized. The aim of this work was to verify the microbial contamination of Phyllanthus niruri aerial parts and derivatives products, such as extractive solution (SE) and spray dried extract (PSA) with the purpose of evaluating the decrease of the contamination after the decoction and the spray dry. The microbiological analysis of the products was performed by total plate count and MPN coliform. The results showed that the contamination of the products was below the limit maxim. The contamination in the SE was significantly lower than in the plant and this fact suggest that the decoction was responsible for a reduction of 98,3 percent of the initial contamination. On the other hand, the PSA contamination was similar the SE thus suggesting that the spray dry did not affect the microorganisms present in the initial product.

Microbial contamination of central supply systems for medical air

There are many standards and recommendations for breathing air quality associated with respiratory protection equipment, but little has been done regarding the possible microbial contamination of medical air. The present study demonstrates quantitatively and qualitatively that pipelines might be incriminated as source of microbial contamination of compressed and synthetic air for medical use. Air samples were drawn into an especially pressure-resistant device and the bacterial and fungi contents were identified after growth on agar plates. The bacterial flora isolated from peripheral air outlets was virtually the same as that found in the central air-generating installations, consisting of a mixture of pathogens and normal skin bacteria. Several factors contributing to microbial contamination of medical air are mentioned and preventive measures are discussed.

Existem vários padrões e recomendações para a qualidade do ar respirável relacionado aos equipamentos de proteção respiratória, mas pouco tem sido feito em relação a uma possível contaminação microbiana do ar medicinal. O presente trabalho demonstra quantitativa e qualitativamente que as linhas de ar estão relacionadas à contaminação microbiológica do ar comprimido e ar sintético para uso medicinal. Amostras de ar foram coletadas por um equipamento especialmente resistente a pressão, e o conteúdo bacteriano e fúngico foi identificado após crescimento em placa. A flora bacteriana isolada tanto dos sistema periféricos de ar foi virtualmente a mesma encontrada nas instalações centralizadas, sendo uma mistura de patógenos e bactérias normais da pele. Vários fatores contribuintes para a contaminação microbiana do ar medicinal e medidas preventivas são discutidas.

Microbial contamination of central supply systems for medical air

There are many standards and recommendations for breathing air quality associated with respiratory protection equipment, but little has been done regarding the possible microbial contamination of medical air. The present study demonstrates quantitatively and qualitatively that pipelines might be incriminated as source of microbial contamination of compressed and synthetic air for medical use. Air samples were drawn into an especially pressure-resistant device and the bacterial and fungi contents were identified after growth on agar plates. The bacterial flora isolated from peripheral air outlets was virtually the same as that found in the central air-generating installations, consisting of a mixture of pathogens and normal skin bacteria. Several factors contributing to microbial contamination of medical air are mentioned and preventive measures are discussed.

Existem vários padrões e recomendações para a qualidade do ar respirável relacionado aos equipamentos de proteção respiratória, mas pouco tem sido feito em relação a uma possível contaminação microbiana do ar medicinal. O presente trabalho demonstra quantitativa e qualitativamente que as linhas de ar estão relacionadas à contaminação microbiológica do ar comprimido e ar sintético para uso medicinal. Amostras de ar foram coletadas por um equipamento especialmente resistente a pressão, e o conteúdo bacteriano e fúngico foi identificado após crescimento em placa. A flora bacteriana isolada tanto dos sistema periféricos de ar foi virtualmente a mesma encontrada nas instalações centralizadas, sendo uma mistura de patógenos e bactérias normais da pele. Vários fatores contribuintes para a contaminação microbiana do ar medicinal e medidas preventivas são discutidas.